Ev / Ürün / Protein Uygulamaları / Proteomik Desteği / Kriyo-elektron Mikroskopi Servisi

Kriyo-elektron Mikroskopi Servisi

Kriyojenik elektron mikroskopisi (kriyo-EM), yapısal biyolojide bilim insanlarının biyolojik makromoleküllerin hassas detaylarını görselleştirmesini sağlayan son teknoloji bir tekniktir. Kriyo-EM, neredeyse atomik çözünürlükte geçirimli elektron mikroskopisine dayanır. İlaç geliştirme, antikorlar, aşılar gibi birçok biyomedikal uygulamada artan pazar talebi.

Ücretsiz Teklif Almak

Kriyo-EM Değeri Yapısal Çözümler Tek Nokta İş Akışı Güvenilir Platformlar Neden Bizi Seçmelisiniz?

Kriyo-EM'nin X-ışını kristalografisine göre avantajları

X-ışını kırınımı hâlâ biraz daha yüksek çözünürlüğe ulaşabilse de, kriyo-EM önemli avantajlar sergilerdir:

Minimum miktarda örnek gereklidir.
Kristalleşmeye gerek yok.
X-ışını için sinkrotron kaynağına gerek yok.
Neredeyse yerli devletin korunması.
Esnekliğin değerlendirilmesi.
Kristalleşmesi zor olan parçacıklar (örneğin virüs) gibi membran proteinleri veya supramoleküler montajlar için uygundur.
Konformasyonların heterojenliği tek bir örnekte çözülebilir.
Düşük saflık seviyesi kabul edildi.

EMDB'deki giriş sayısının üstel artışı:

Yapısal Çözümler

Örnek Uygunluk Değerlendirmesi – Negatif Leke

Kriyo-EM'de önemli mikroskop kaynakları kullanılmadan önce, negatif leke incelemesi genellikle oda sıcaklığında ve düşük voltajda yapılır. Bu adım, yüksek elektron yoğunluğuna sahip boyama ajanı kullanılarak örnek uygunluğunun, homojenlik, toplayıcı, parçacık morfolojisi, boyut ve dağılımın değerlendirilmesine olanak tanır.

Negatif boyama, bir örneğin aşağı akış kriyo-EM veri toplama için uygun olup olmadığını değerlendirmek için kritik bir kalite kontrol adımı olarak hizmet eder.

Yüksek Çözünürlüklü Yapı Belirleme – Tek Parçacık Analizi (SPA)

Kriyo-EM veri toplama genellikle farklı yönlerde yakalanan parçacıkların yaklaşık 10⁴ ila 10⁶ bireysel iki boyutlu projeksiyonlarını üretir. Bu projeksiyonlar, üç boyutlu yoğunluk haritasını nanometrik veya atoma yakın çözünürlükte yeniden oluşturmak için görüntü işleme iş akışı aracılığıyla hesaplamalı olarak hizalanır ve sınıflandırılır.

Daha sonra bir atomik model yeniden oluşturulmuş yoğunluk haritası içinde inşa edilir, iyileştirilir ve doğrulanır; böylece ilgilenilen biyolojik makromolekülün işlevsel mekanizmalarına dair yapısal içgörüler sağlanır.

Yerinde Yapısal Analiz – Kriyo-Elektron Tomografi (Cryo-ET)

Kriyoelektron tomografisi, biyolojik yapıların doğal hücresel veya viral bağlamda üç boyutlu görselleştirilmesini sağlar. Bu yaklaşım, büyük makromoleküler yapıların, zarla ilişkili komplekslerin ve viral enfeksiyon mekanizmalarının incelenmesi için özellikle uygundur; tek parçacık yöntemleriyle erişilemeyen mekânsal ve organizasyonel bilgiler sunar.

Hizmet İş Akışı

Proje danışmanlığı → NDA imzalanması, → hizmet sözleşmesi onayı, → örnek alınması, kalite denetimi→ →negatif leke taraması → kriyo-EM veri toplama → veri işleme → rapor teslimatı.

Veriler ve Sonuç Teslimatları

Proje yaşam döngüsü boyunca tam veri erişilebilirliği sağlanır. Teslim edilen materyaller arasında kazanç referans dosyalarına sahip ham kriyo-EM filmler, veri işlemenin çeşitli aşamalarındaki ara veri dosyaları, çözünürlük ve kalite metrikleriyle nihai üç boyutlu yoğunluk haritaları, uygun olduğunda atomik koordinat modelleri ve MolProbity değerlendirmeleri gibi çapraz doğrulama raporları bulunur.

Tüm veriler taşınabilir depolama cihazları veya güvenli bulut tabanlı platformlar aracılığıyla iletilebilir.

Üç Ana Ekipman

Kriyo-EM hizmetlerimiz, en son teknoloji enstrümantasyonla donatılmış üst düzey bilimsel araştırma platformlarına erişimle desteklenmektedir.

Mevcut sistemler şunlardır Talos L120C G2, giriş seviyesi bir iletim elektron mikroskopisi ve kriyo-EM tarama platformu; Glaciers 2, rutin tek parçacık ve tomografi iş akışları için optimize edilmiş 200 kV bir iş atı kriyo-EM sistemi; ve Titan Krios G4, maksimum istikrar, otomasyon, veri verimliliği ve çözünürlük potansiyeli için tasarlanmış amiral gemisi 300 kV kriyo-EM platformu.

Bu platformlar, kriyo-ızgara tarama, tek parçacık analizi, kriyoelektron tomografi ve gelişmiş yöntem geliştirmeyi çok çeşitli yapısal biyoloji uygulamalarında desteklemektedir.

Neden Longlight?

Kriyoelektron mikroskopi alanında değerli ve olgun deneyim sunuyoruz; üst düzey bilimsel araştırma platformlarına erişim ve sektör uzmanları ile akademik bilimsel danışmanlarla iş birliği yapıyoruz. Hizmetlerimiz, ham verileri, ara işlem dosyalarını, nihai yoğunluk haritalarını, atomik modelleri ve doğrulama raporlarını kapsayan tam şeffaflık ve bütünlükle veri teslimatını vurgular.

Gelişmiş enstrümantasyon, deneyimli veri işleme iş akışları ve dengeli teslimat zaman çizelgelerini birleştirerek, çeşitli araştırma ihtiyaçlarına uygun güvenilir, yüksek kaliteli kriyo-EM yapısal çözümler sunuyoruz.

Sıkça Sorulan Sorular.

S1: Müşterilerin hazırlaması için ne kadar örnek gerekiyor?

Negatif boya:

minimum konsantrasyon ~1 g/L

minimum hacim ~100 μL.

Çözünür proteinli SPA:

minimum konsantrasyon ~1 g/L

minimum hacim ~100μL.

Zar proteinleriyle SPA:

minimum konsantrasyon ~1 g/L

minimum hacim ~100μL.

Gerekirse tartışılıp ayarlanacak

S2: Örnek tamponu için gereksinimler nelerdir?

pH aralığı: 6.0-8.5
Tuz konsantrasyonu <200 mM
Düşük gliserol (ne kadar? doi: 10.1107/S2053230X24002553)
Düşük Azide (ne kadar? destekleyici referans eksik)

S3: Tipik bir servis süreci nedir?

Proje danışmanlığı → NDA imzalanması, → hizmet sözleşmesi onayı, → numune alınması, kalite denetimi →→ negatif leke veri →toplama → veri işleme → raporun teslimatı.

S4: Ortalama teslimat süresi nedir?

Negatif lekelenme: 1-2 hafta.
SPA, ön sonuçlar: 6-8 hafta.
SPA, yüksek çözünürlüklü model: 2-3 ay.

ChIP-devamı

ChIP, DNA ve proteinler arasındaki etkileşimi inceler ve ChIP-seq, proteinler ve kromatin arasındaki etkileşimi incelemek için kullanılan genomdaki spesifik transkripsiyon faktörlerine / histonlara bağlanan DNA bölgelerini tespit etmek için yeni nesil dizileme ile birleştirilir.

Genom Bilimi

Longlight, moleküler tanı ve moleküler biyolojiye odaklandı, insan tıbbi nedenine daha iyi hizmet etmek için genomiğin gelişimini teşvik etmeye kendini adamış olan Odaklanmış Ultrasonikatör olmak üzere bazı NGS ile ilgili cihazları ve reaktif sarf malzemelerini piyasaya sürdük.

Sarf Malzemeleri ve Kitler

Longlight, farklı türlerde prekast agaroz jel, nükleik asit tutucu, Qubit tüpü, nükleik asit ekstraksiyon kitleri ve kütüphane hazırlama kitleri sağlar. Bu arada, bu ürünlerin tümü temel bilimsel araştırmalarda, biyofarmasötiklerde ve diğer uygulama senaryolarında yaygın olarak kullanılabilir.